اسپان مادری، به اسپانی گفته می شود که از آن برای تلقیح اسپان تجاری استفاده می شود. اسپان مادری به اشکال مختلف تولید می شود. برای مثال اسپان مادری مورد استفاده در سیستم وی-بلندر ممکن است مایع باشد یا به شکل یک محیط کشت جامد تولید شده باشد. اما در ایران ماده زمینه ای مورد استفاده برای اسپان مادری، مشابه اسپان تجاری است. اما دو تفاوت عمده در آنها وجود دارد. اول اینکه اسپان تجاری معمولاً در کیسه و اسپان مادری معمولاً در ظروف شیشه ای تولید می شود. دوماً برای تلقیح اسپان مادری از ریسه خالص رشد یافته روی محیط کشت های آگار دار استفاده می شود. استفاده از ظروف شیشه ای برای تولید اسپان مادری، علاوه بر اینکه احتمال آلودگی را کاهش می دهد، امکان تلقیح کیسه ها را نیز آسان تر می کند.